蛋白质研究技术中心蛋白质制备与鉴定平台将于2023年10月18日、19日(周三、四)14:00-17:00在生物医学馆E203举行桌面式荧光相关光谱单分子分析仪smFRET功能讲座培训。
仪器介绍:Cortector SX300桌面式荧光相关光谱单分子分析仪整合了FCS、FCCS、smFRET等单分子分析技术,可在微量溶液样品中,无需反应物分离(均相),快速(数秒至数分钟)检测分子或纳米颗粒的摩尔浓度、扩散系数/水动力半径、相互作用亲和力、构象变化等特性,可广泛应用于细胞信号传导机制、生物分子结构-功能机制、生物分子变性聚集、生物分子液-液相分离、磷脂双分子层相分离、抗体与药物筛选、病原体检测、疾病标志物检测、酶活性检测、化学动力学常数检测、荧光探针分子或纳米颗粒特性分析、纳米药物在生理样品(血浆、全血)中的特性分析、外泌体分析、高分子聚合物分析、微流控技术开发等研究领域。
培训内容:smFRET技术原理与构象变化检测讲座,FCS测浓度、扩散系数/水动力半径上机培训,FCS/FCCS测分子相互作用上机培训,并交流实验技巧及问题讨论与解决。
培训时间:2023年10月18日、19日(周三、四)
培训日程:
培训方式:线上线下相结合
联系方式:常老师changqing#mail.tsinghua.edu.cn(发送邮件时请将“#”替换成“@”)
报名方式:
访问链接:
http://proteinreasearch-e212.mikecrm.com/kINbzkj
或扫描二维码:
备注:
1.上机培训请发送邮件报名(场地有限,限校内用户5人)。如自带样品需提前至少一天邮件联系。
2.报名截止时间10月17日17:00,报名截止后通过邮件发送培训链接,请提供准确的电子邮箱地址。
蛋白质制备与鉴定平台
蛋白质研究技术中心
附:自带实验样品上机要求
一、溶液或细胞裂解液样品需自发荧光或已被荧光标记
推荐使用Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 647、Atto488、Atto655、Cy5、Rhodamine Green系列染料,类型为溶液或细胞裂解液,FCS实验中样品浓度一般为1nM~100nM,若样品是质量浓度,建议提前换算成摩尔浓度,方便实验过程中进行稀释。
二、FCS测分子扩散系数、大小(水动力半径)实验样品要求
1、样品能被488nm/561nm/638nm激光激发。
2、样品直径<100nm。(BSA,66kDa,直径≈7nm,可作为参考)
三、FCS测分子间相互作用实验样品要求
1、准备存在相互作用的两种分子,且两种分子的分子量相差四倍以上。
2、较小分子样品带有荧光标签或自发荧光,且能被488nm/561nm/638nm激光激发,且较大分子不会被488nm/561nm/638nm激光激发。(更推荐使用Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 647、Atto488、Atto655、Cy5、Rhodamine Green标记的样品)
3、样品直径<100nm。
四、FCCS测分子间相互作用实验样品要求
1、准备存在相互作用的两种分子。其中一种分子能被488nm激光激发,不能被638nm激光激发;另一种分子能被638nm激光激发,不能被488nm激光激发。
2、样品直径<100nm。
五、smFRET测构象变化实验样品要求
待测分子标记两种不同的荧光分子,可从488/561/638激发中选择,要求两种荧光分子的量子产率>0.1,且光谱存在一定重叠,不同FRET荧光组合之间的Forster半径可从以下网站查到:https://www.fpbase.org/fret/